Fluorescenta in situ hibridizare
Fluorescența hibridizării in situ (FISH) este una din mai multe tehnici utilizate pentru a căuta ADN-ul celulelor dvs., căutând prezența sau absența unor gene specifice sau porțiuni de gene.
Multe tipuri diferite de cancer sunt asociate cu anomalii genetice cunoscute. Și prin genetică, nu vorbim doar despre ereditate. Pe parcursul unei vieți, celulele pot face greșeli atunci când se împart și cresc.
Mutațiile din ADN care sunt asociate cu cancer se pot acumula în aceste celule.
Cum functioneaza FISH?
FISH este o tehnică care utilizează sonde fluorescente pentru a detecta anumite gene sau părți ale genelor (secvențe ADN). Personalul laboratorului din centrul medical și oncologii utilizează FISH pentru a ajuta la evaluarea pacienților care pot avea cancer și, uneori, pentru a monitoriza un pacient care a fost deja diagnosticat cu cancer și tratat.
FISH se poate realiza folosind diferite tipuri de probe în funcție de locația și tipul de cancer suspectat: celulele tumorale obținute din sângele periferic, dintr-o biopsie a măduvei osoase sau dintr-o biopsie a ganglionilor limfatici și țesutul încorporat cu parafină fixată în formalină (se referă la un eșantion de țesut care este procesat în laborator și încorporat într-un tip de ceară, făcându-l mai rigid, astfel încât să poată fi tăiat în secțiuni subțiri și montat pentru vizualizare sub microscop).
Ce înseamnă literele?
"H" din FISH se referă la hibridizare.
În hibridizarea moleculară, o sondă de ADN sau ARN marcată este folosită ca o probă - vizualizați o cărămidă Lego roșie, dacă doriți. Sonda este folosită pentru a găsi o cochilie legendă Lego, sau o secvență ADN, într-o probă biologică.
ADN-ul din eșantion este ca niște grămezi de cărămizi Lego, iar cele mai multe cărămizi din aceste grămezi nu se vor potrivi cu sonda noastră roșie.
Și toate cărămizile tale sunt bine organizate în 23 de perechi de grămezi de cărămizi - fiecare grămadă este unul dintre cromozomii omologi perechi, mai mult sau mai puțin. Spre deosebire de cărămizi Lego, sonda noastră Lego roșie este ca un magnet puternic și își găsește meciul fără a trebui să sorteze grămezile.
"F" se referă la fluorescență. Sonda noastră roșie s-ar putea pierde în grămezi de cărămizi, deci este etichetat cu un colorant fluorescent colorat, astfel încât acesta să strălucească. Când își găsește potrivirea între cele 23 de grămezi perechi, o etichetă fluorescentă își arată locația. Deci, acum puteți vedea cum cercetătorii și clinicienii ar putea utiliza FISH pentru a ajuta la identificarea unde (care grămadă sau care cromozom) o anumită genă este localizată pentru un anumit individ.
"I" și "S" sunt in situ . Acest lucru se referă la faptul că cărămida noastră roșie Lego își caută meciul în cadrul mostrei pe care ați dat-o .
Ce sunt cancerul de sange specific?
FISH și alte proceduri de hibridizare in situ sunt utilizate pentru a diagnostica o varietate de anomalii cromozomiale - modificări ale materialului genetic, modificări ale cromozomilor, inclusiv următoarele:
Ștergerea - parte a unui cromozom este dispărută
Translocația - parte a unui cromozom se rupe și se lipsește de un alt cromozom
Inversiunea - o parte a unui cromozom se rupe și reintroduce înapoi, dar în ordine inversă
Duplicarea - parte a unui cromozom este prezentă în prea multe copii în interiorul celulei
Fiecare tip de cancer poate avea un set propriu de modificări cromozomiale și sonde relevante. FISH nu numai că ajută la identificarea modificărilor genetice inițiale într-un proces de boală, cum este cancerul, dar poate fi de asemenea utilizat pentru a monitoriza răspunsul la terapie și la remiterea bolii.
Modificările genetice detectate de FISH oferă uneori informații suplimentare despre modul în care se poate comporta un cancer al unui individ, pe baza a ceea ce sa observat în trecut în cazul persoanelor cu același tip de cancer și modificări genetice similare. Uneori se utilizează FISH după ce diagnosticul a fost deja făcut, pentru a obține informații suplimentare care ar putea contribui la prezicerea rezultatelor unui pacient sau a celui mai bun tratament.
FISH poate identifica anomalii cromozomiale la leucemii , inclusiv la leucemia limfocitară cronică (CLL). Pentru leucemia limfocitară cronică / limfom limfocitar mic, FISH permite pacienților să-și descopere categoria prognostică: bună, intermediară sau săracă. În leucemia limfoblastică acută (ALL), genetica celulelor leucemice vă poate spune despre nivelul de risc al cancerului și vă ajută să ghidați deciziile terapeutice.
Panourile FISH sunt de asemenea disponibile pentru limfom, mielom multiplu, tulburări proliferative ale celulelor plasmatice și sindrom mielodisplazic. În cazul limfomului cu celule de manta, de exemplu, există o translocație pe care FISH o poate detecta numită GH / CCND1 t (11; 14) care este frecvent asociată cu acest limfom.
De ce FISH?
Un avantaj al FISH este că nu trebuie efectuat pe celulele care se împart în mod activ. Testarea citogenetică durează de obicei aproximativ trei săptămâni, deoarece celulele canceroase trebuie să crească în vase de laborator timp de aproximativ două săptămâni înainte ca acestea să poată fi testate. În schimb, rezultatele FISH sunt de obicei disponibile în laborator în câteva zile.
> Surse:
> Codurile CPT pentru testarea citotoxică a cancerului.
> Hibridizarea în fluorescență în situ (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Hibridizarea în fluorescență în situ (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD și colab. Orientări pentru testarea hibridizării fluorescente in situ în tulburările hematologice. Jurnalul de Diagnosticare Moleculară: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.